全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測(cè)序中的應(yīng)用

更新時(shí)間：2022-05-31

點(diǎn)擊次數(shù)：1068

　　單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)目前正應(yīng)用得如火如荼，比如單細(xì)胞RNA測(cè)序(scRNA-seq)和染色質(zhì)轉(zhuǎn)座酶可接近性測(cè)序(ATAC-seq)。與傳統(tǒng)的大量細(xì)胞測(cè)序方法相比，單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)突出了細(xì)胞之間的差異，有助于更深入地了解樣本材料。例如，scRNA-seq能夠比較健康和疾病狀態(tài)下的轉(zhuǎn)錄圖譜，而ATAC-seq能夠說(shuō)明染色質(zhì)可接近性及其對(duì)基因表達(dá)的影響。

　　不過(guò)，此類研究都需要對(duì)分離的細(xì)胞核進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，因?yàn)槲膸?kù)制備的要求是未裂解細(xì)胞的數(shù)量低，且樣本中不含細(xì)胞團(tuán)塊和碎片。此外，許多單細(xì)胞基因組學(xué)技術(shù)都需要完整的細(xì)胞核才能正常運(yùn)行。

　　全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用的方法？

　　臺(tái)盼藍(lán)染色法：

　　臺(tái)盼藍(lán)染色是常用的對(duì)死活細(xì)胞進(jìn)行分別計(jì)數(shù)的方法之一，染色原理是臺(tái)盼藍(lán)不能透過(guò)活細(xì)胞完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色；而死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜損傷，染料透過(guò)細(xì)胞膜在細(xì)胞內(nèi)富集而使細(xì)胞著藍(lán)色。不過(guò)，臺(tái)盼藍(lán)染色并不一定能準(zhǔn)確分辨有核細(xì)胞和細(xì)胞碎片，因此它往往低估細(xì)胞總數(shù)而高估細(xì)胞活力。

　　熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)方法：

　　吖啶橙/碘化丙啶(AO/PI)染色原理：活細(xì)胞經(jīng)AO染色發(fā)出綠色熒光，而死細(xì)胞經(jīng)PI染色發(fā)出紅色熒光。重要的是，對(duì)背景復(fù)雜的細(xì)胞，比如說(shuō)外周血單個(gè)核細(xì)胞，含有細(xì)胞碎片較多或成簇的細(xì)胞計(jì)數(shù)，避免了細(xì)胞碎片的檢測(cè)。這種方法最近也應(yīng)用在單細(xì)胞基因組學(xué)應(yīng)用上，其中綠色對(duì)應(yīng)了完整細(xì)胞，而紅色對(duì)應(yīng)了成功分離的細(xì)胞核。這種策略讓研究人員能夠計(jì)算未裂解的殘留細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分比，同時(shí)對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行計(jì)數(shù)，提示樣本質(zhì)量，幫助研究人員確定是否繼續(xù)進(jìn)行單細(xì)胞基因組學(xué)流程。

返回列表

聯(lián)系地址
廣州市黃埔區(qū)中汭-鉅富產(chǎn)業(yè)港A棟17樓
聯(lián)系郵箱
18124609201@163.com
聯(lián)系電話
020-31609340
聯(lián)系QQ

快速導(dǎo)航

產(chǎn)品中心公司簡(jiǎn)介企業(yè)文化公司新聞技術(shù)文章聯(lián)系方式地圖導(dǎo)航在線留言

關(guān)注公眾號(hào)

技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 sitemap.xml

一区二区三区精品久久久,久久这里精品视频免费中文字幕,欧美日韩亚洲中文另类,欧美日韩亚洲国产综合网

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在單細(xì)胞測(cè)序中的應(yīng)用